日期:2023-07-27 點擊: 258 次
在PCR實驗室的管理中應盡量避免污染產生,如果不慎產生了污染也有對應的處理方法,博泰小編帶大家了解關于PCR實驗室污染的處理方法及注意事項有哪些。
一、PCR實驗室檢測被污染的方法
1、酶解酶可將長鏈的核酸分子降解成小片段。
2、高壓變性:高壓可以將核酸降解成20-30bp的小片段。
3、紫外照射:PCR產物中嘧啶堿基會形成二聚體,延伸終止。
4、修飾:標記遺傳物質,阻止聚合酶與核酸的結合,從而抑制DNA擴散。
5、酒精擦拭:將核酸沉淀,擦拭后保證污染表面污染得到一定程度的緩解。
二、PCR實驗操作注意事項
1、操作時設立陰陽性對照和空白對照,即可驗證PCR反應的可靠性,又可以協助判斷擴增系統的可信性。
2、使用一次性吸頭,嚴禁與PCR產物分析室的吸頭混用,吸頭不要長時間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染。
3、避免反應液飛濺,打開反應管時為避免此種情況,開蓋前稍離心收集液體于管底。若不小心濺到手套或桌面上,應立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面。
4、操作多份樣品時,制備反應混合液,先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好,然后分裝,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應的精確度。
5、由于加樣器容易受產物氣溶膠或標本DNA的污染,最好使用可替換或高壓處理的加樣器。如沒有至少PCR操作過程中加樣器應該專用,不能交叉使用,尤其是PCR產物分析所用加樣器不能拿到其它兩個區。
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